植物種子(大型)直接PCR試劑盒-防PCR產(chǎn)物污染體系

 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

直接使用種子裂解液作為模板進(jìn)行PCR擴增，無(wú)需單獨抽提DNA，快速，靈敏度高，適合快速大規?；驒z測。

增加了UNG防污染體系，杜絕假陽(yáng)性；試劑盒包含裂解液/PCR Mix

產(chǎn)品特點(diǎn)

無(wú)需進(jìn)行費時(shí)而昂貴的DNA純化。

樣品需求量小，只需取單粒種子即可。

無(wú)需研磨、破碎等特殊處理，操作簡(jiǎn)便。

優(yōu)化的PCR體系，使PCR具有更高的特異性、更強的PCR反應抑制物耐受性。

防污染PCR體系2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)，有效消除由PCR產(chǎn)物所引起的污染，保證擴增的特異性和準確性。

產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨特的裂解反應體系，能夠快速的從多糖多酚含量低的植物種子樣本(如：水稻、小麥、煙草、玉米、大豆等)中釋放出基因組DNA，用于PCR反應，因此特別適合大規?；驒z測。為了滿(mǎn)足不同檢測試驗的需要，本試劑盒可以使用多種類(lèi)型的樣本(如完整種子、微量組織切塊或多顆種子的磨碎樣本)進(jìn)行實(shí)驗。其中，對于還需要進(jìn)行萌發(fā)的種子樣本，可以選擇切取種胚以外的微量組織切塊(1-5mg)進(jìn)行實(shí)驗；對于需要在大量樣本中進(jìn)行抽樣檢測的實(shí)驗，可以選擇將多個(gè)樣本混合并磨碎成直徑0.5mm左右的顆粒后再進(jìn)行實(shí)驗(最低可以檢測出0.1%的目的樣本)。

裂解反應體系釋放基因組DNA過(guò)程可以在5-10min內完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產(chǎn)物的過(guò)程，即可將釋放出的微量DNA作為模板進(jìn)行PCR反應。

2× Seed PCR EasyTM Mix具有很強的PCR反應抑制物耐受性，能直接以植物材料的裂解混合液為模板，進(jìn)行高效特異性擴增。該試劑包含公司專(zhuān)門(mén)針對直接PCR改造的D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優(yōu)化劑和穩定劑。與裂解反應體系配合使用能夠快速簡(jiǎn)便地對樣品進(jìn)行檢測，并具有靈敏度高、特異性強、穩定性好等特點(diǎn)。

2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)在2× Seed PCR EasyTM Mix的基礎上用dUTP替代了dTTP，并同時(shí)加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反應前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，UNG酶對不含有尿嘧啶的模板不會(huì )造成任何影響，從而保證擴增的特異性和準確性，防止了大規?；驒z測時(shí)可能出現的PCR產(chǎn)物污染問(wèn)題。

D-Taq DNA polymerase是Foregene為直接PCR反應專(zhuān)門(mén)研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase對多種PCR反應抑制劑具有極強的的耐受性、在各種復雜反應體系中均能高效擴增痕量的DNA，擴增速度可達2Kb/min，特別適合進(jìn)行直接PCR反應。

根據植物樣本差異，該產(chǎn)品分為兩個(gè)大類(lèi)：植物種子直接PCR試劑盒(Plant Seed Direct PCR Kit)和多糖多酚植物種子直接PCR試劑盒(Plant Seed Direct PCR Plus Kit)。在裂解階段，考慮到不同類(lèi)型的種子或組織材料在裂解過(guò)程中試劑用量差異較大，客戶(hù)可根據自己實(shí)驗材料的大小選擇相應的植物種子(中小型)直接PCR試劑盒或植物種子(大型)直接PCR試劑盒；在PCR檢測階段，客戶(hù)也可以根據實(shí)驗需求，選用普通的2× Seed PCR EasyTM Mix或是具有防PCR擴增產(chǎn)物污染作用的2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)。

試劑盒應用

適用范圍：多種植物葉片。

樣本裂解釋放的DNA：僅用作PCR模板。

試劑盒可用于以下用途：轉基因植株鑒定、植物基因分型等。

試劑盒局限性

擴增片段≤1kb；超過(guò)1kb，擴增效率下降或者擴增失敗。

UNG防PCR產(chǎn)物污染體系得到的PCR產(chǎn)物請勿用于基因克隆或測序。

PCR產(chǎn)物3’末端隨機加A尾。

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