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    細菌基因組重測序

    技術(shù)簡(jiǎn)介

    細菌基因組重測序是對已有參考基因組信息的細菌進(jìn)行基因組水平的再測序,并對個(gè)體或者群體樣品進(jìn)行生物信息學(xué)分析,能夠分析近源菌種之間的單核苷酸多態(tài)性 (SNPs) 、插入 (Insertion) 、缺失 (Deletion) 、拷貝數變異  (CNV)等基因組水平變異類(lèi)型,為篩選菌株的優(yōu)良性狀,菌株抗藥性等研究提供指導與依據。

    技術(shù)路線(xiàn)

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    送樣建議

    濃度 (Qubit)體積總量基因組完整性
    ≥50 ng/μL≥30 μL≥20 μgDNA 無(wú)降解

    技術(shù)參數

    細菌重測序測序策略數據量周期

    300bp 小片段文庫HiSeq/NovaSeq PE150

    100X45個(gè)自然日

    案例分析

    細菌全基因組重測序闡述引起大腸桿菌自發(fā)突變的因制[1]

    研究背景                

    完全了解一個(gè)進(jìn)化過(guò)程需要自發(fā)突變率,光譜識別以及物種特征三個(gè)因素。根據累積突變可以計算出每一代基因組的突變率。

    研究目的

    通過(guò)全基因組重測序技術(shù)研究進(jìn)化過(guò)程中自發(fā)突變效應影響。

    研究結果

    在三株大不相同的不同僅僅達到 50%,這也就說(shuō)明了每一代基因組中的突變率是 1–2×10?3 。四個(gè)因素決定了自發(fā)突變的發(fā)生:自身 DNA 聚合酶缺陷,內源性誘導 DNA 損傷,外源性藥物誘導 DNA 損傷,易錯聚合酶激活

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    圖1. DNA修復缺陷的大腸桿菌堿基替換率

    參考文獻

    [1]Foster, P. L., Lee, H., Popodi, E., Townes, J. P. & Tang, H. Determinants of spontaneous mutation in the bacterium Escherichia coli as revealed by whole-genome sequencing. Proc Natl Acad Sci U S A 112, E5990-5999, doi:10.1073/pnas.1512136112 (2015).

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